聚丙烯酰胺凝胶制胶配方

聚丙烯酰胺凝胶制胶配方

聚丙烯酰胺凝胶分离胶与浓缩胶的配方整理如下，分浓度和用途提供具体成分配比：1. 分离胶配方（以10%浓度，10ml体积为例）成分用量：•30%丙烯酰胺混合液：3.3ml•1.5mol/L Tris-HCl（pH8.8）：2.5ml•10% SDS：0.1ml•双蒸水：3.9ml•10%过硫酸铵（AP）：0.1ml•TEMED：0.004ml功能说明：丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺构成凝胶基质，浓度决定孔径大小；Tris-HCl缓冲液稳定pH环境，SDS确保蛋白质带电均一性；AP与TEMED通过自由基反应催化聚合，需最后添加并快速混匀。2. 浓缩胶配方（以5%浓度，5ml体积为例）成分用量：•30%丙烯酰胺混合液：0.83ml•0.5mol/L Tris-HCl（pH6.8）：1.25ml•10% SDS：0.05ml•双蒸水：2.82ml•10% AP：0.05ml•TEMED：0.005ml功能说明：较低浓度的凝胶形成更大孔径，利用移动界面效应压缩蛋白样品；pH6.8的Tris环境与分离胶形成缓冲体系差异，实现定向富集作用。配胶时建议先配制分离胶，待凝固后再灌注浓缩胶，聚合时间与环境温度相关。若需调整凝胶浓度，按总丙烯酰胺含量占比换算基础混合液体积即可。